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技術(shù)資料
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食用菌栽培技術(shù)有哪三種基本方法
微生物的培養(yǎng)方法有三種,即純培養(yǎng)法、選擇性培養(yǎng)法和優(yōu)勢培養(yǎng)法。
一、 菌種制作的基本設(shè)備 1、
食用菌菌種
制作的工藝流程 培養(yǎng)料的貯備和預(yù)處理------- 容器、工具的洗滌------ 配料、培養(yǎng)基制作------ 滅菌------ 冷卻------ 接種------ 培養(yǎng)------- 貯存 2、 基本設(shè)施 ① 廠房:② 原料庫③原料預(yù)處理場地④ 洗滌室:5配料室⑥ 滅菌室⑦ 接種室⑧ 化驗室 ⑨ 培養(yǎng)室⑩貯存室 二、 純種分離 菌種的分離方法主要有:孢子分離法、組織分離法、基內(nèi)菌絲分離法和土中菌絲分離法。 1、 孢子分離法:屬
有性繁殖
。對于香菇、平菇異宗結(jié)合的菇類,為避免產(chǎn)生單孢不孕現(xiàn)象,必須采用多孢分離法。單孢分離法主要用于
雜交育種
的研究。 ⑴ 種菇的選擇和處理 種菇選擇的標準:必須純正,具有本菌株性狀,發(fā)育健壯,無病蟲害,成熟度適當。種菇選定后,首先除去附著在菇體表面的雜物,如蘑菇、草菇可用0.1%升汞浸泡消毒2-3分鐘,然后用無菌水漂洗3次,以洗除表面附著的藥物,最后用無菌紗布吸干水分。香菇、平菇可用
75%酒精
進行表面消毒。 (2)多孢分離法 ① 整菇播種法② 鉤懸法③ 貼附法 4菌褶上抹取孢子法⑤ 孢子印分離法 ⑥ 空中孢子捕捉法 (3)單孢子分離法 一般采用方法:平板稀釋法、連續(xù)稀釋法、毛細管法等。 2、 組織分離法 (1) 子實體分離法(2)菌核分離法(3)菌索分離法:對一些不易找到子實體及菌核的菌類 3、基內(nèi)菌絲分離法 對于子實體只有在特定的季節(jié)下出現(xiàn),平時不易采到,或子實體小而薄或呈膠質(zhì)狀態(tài)(1)菇木(或耳木)分離法 在食用菌繁殖旺盛期 (2) 代料基質(zhì)分離法 分離前,選擇一批子實體發(fā)生早、產(chǎn)量高、菇體尚幼嫩且生活力強而無病蟲害的栽培袋,待子實體將近成熟時,去掉子實體,然后用
75%酒精
將培養(yǎng)袋進行消毒后,在培養(yǎng)料下1.5cm處挑取0.3cm的培養(yǎng)料小方塊組織,接入試管培養(yǎng)基的中央,置于恒溫下培養(yǎng)。 3、 土中菌絲分離法: 用于采集生長在土中的菇類菌絲體 三、制種技術(shù) 采用孢子分離、組織分離和基內(nèi)菌絲分離等方法分離培養(yǎng)而獲得的純菌絲,經(jīng)過原種的擴大培養(yǎng)和母種、栽培種的制作,即可作為食用菌生產(chǎn)用的菌種。 1、 菌種的類型 母種、原種、生產(chǎn)種 2、 培養(yǎng)基的種類 天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基 3、 原種制作 從擔(dān)孢子或菇體組織直接分離培養(yǎng)獲得的原種或引進的原種 4、 母種及生產(chǎn)種制作 將原種菌絲體移植到由糞、草、木屑、棉籽殼或麥粒等原料配制成的培養(yǎng)基上,而制成的菌種稱母種。將母種再擴大繁殖制成的菌種,稱栽培種或生產(chǎn)種。 5、 培養(yǎng)基滅菌 (1)
高壓蒸汽滅菌法
瓊脂培養(yǎng)基采用1.05kg/cm2 壓力,溫度121℃ ,滅菌45-60分鐘;母種和栽培種
固體培養(yǎng)基
采用1.2-1.5kg/cm2 壓力,溫度123-129℃ ,滅菌1-1.5 小時。 (2) 常壓蒸汽滅菌 6、 接種室消毒滅菌 熏蒸消毒法:甲醛與
高錳酸鉀
混合熏蒸法 (2)
紫外線消毒
:(3)石碳酸滅菌 7、 接種 在無菌條件下,將原種或母種菌種移接到經(jīng)過嚴格滅菌的培養(yǎng)基上,稱為接種。 8、 菌種培養(yǎng) (1)原種培養(yǎng) 接種后的試管原種,置于25℃左右的恒溫箱中培養(yǎng),經(jīng)過2-3天即可檢查生長情況,純潔菌種經(jīng)過7-15天的培養(yǎng),原種菌絲即可長滿
斜面培養(yǎng)基
。 (2)母種及栽培種培養(yǎng) 栽培種接種后置于25℃左右的培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)。當菌種瓶中菌絲體伸入培養(yǎng)基的1/3時,培養(yǎng)室內(nèi)的溫度可降低2-3℃,以避免菌絲生長代謝加強,料溫上升而引起高溫障礙。培養(yǎng)室內(nèi)保持60-70%的
空氣相對濕度
。一般經(jīng)過20-40天的培養(yǎng),菌絲即可擴散生長到整個培養(yǎng)基,再經(jīng)過7-10天即可培養(yǎng)出優(yōu)質(zhì)的菌種。 四、菌種保藏方法及復(fù)壯技術(shù) 1、 菌種保藏方法 菌種保藏的基本手段是采用低溫、冷凍、干燥、減少供氧量等方法,終止其繁殖,降低其代謝強度,使之處于休眠狀態(tài)。 (1) 斜面低溫保藏法:保藏時間不長。(2) 液體石蠟保藏法:保藏期限可達3-5年。 (3)濾紙保藏法:保藏期限可達2-5年。(4)真空冷凍干燥保藏法:保存時間可達數(shù)年(5)液態(tài)氮超低溫保藏法:近年國際流行的新技術(shù)。 2、 菌種復(fù)壯技術(shù) 提純復(fù)壯。主要有組織分離法及菌絲體復(fù)壯的方法。
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